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冰凍切片(Frozen Section)的基本原理、實驗操作及注意事項

冰凍切片是一種常用的細胞學(xué)制備技術(shù),它通過將組織樣本冷凍并解凍后制成薄片,使得觀察者可以直接看到其內(nèi)部的微細結(jié)構(gòu)。這種技術(shù)特別適用于研究活體組織中的特定分子。

實驗操作通常包括樣品準備、固定、切割和冷凍等步驟。我們首先要選擇合適的樣本進行處理,比如取下一塊新鮮的組織樣本,將其放入生理鹽水中浸泡一段時間,以去除多余水分;接著進行冷凍處理,將組織塊放在液氮中快速凍結(jié)至室溫下即可;最后將凍干的組織片切成薄片,以便于觀察。

在進行冰凍切片實驗時,需要注意以下幾點事項:

1. 樣本的選擇至關(guān)重要,應(yīng)盡量選取新鮮、完整且無污染的組織樣本。

2. 固定時間不宜過長,以免影響切片的質(zhì)量。

3. 切片厚度要均勻,一般控制在10μm左右。

4. 冷凍溫度不能過高,否則會影響組織的完整性。

對于實驗數(shù)據(jù)的記錄,我們需要詳細地記錄實驗步驟、結(jié)果以及出現(xiàn)的問題,這有助于后續(xù)的研究和改進。在進行凝膠遷移與電泳遷移率實驗時,我們可以測量樣品在不同濃度的電場下的遷移距離,以此來評估它們的遷移率。

實驗筆記丨凝膠遷移與電泳遷移率實驗(EMSA)

EMS

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